化学前沿应用丛书--酶联免疫分析技术及应用

酶联免疫分析是以生物酶为标记物的标记免疫分析法，它将抗原抗体反应的特异性与酶的高效催化放大作用相结合，既保持了酶催化反应的敏感性，又保持了抗原抗体反应的特异性，因而极大地提高了灵敏度。应用于医学检验、植物病毒检验、动物检疫检验、食品检验等，成为抗原抗体检测的强有力的手段。
本书主要是以近十几年酶联免疫分析的基础研究和应用研究以及国内外最新成果为素材的专著。全书共分7章。
第1章为免疫分析，由孙伟副教授撰写。介绍免疫分析的基本概念、原理及方法 。免疫分析是利用抗体与抗原的特异性结合作用来选择性识别和测定可以作为抗体或抗原的待测物，抗原抗体反应的特异性和专一性决定了免疫反应具有很高的选择性。本章内容包括抗原、抗体的概念、性质、分类及制备方法；抗原抗体结合反应的原理、特点及影响因素；免疫分析的类型及胶体金标记免疫分析、脂质体放大免疫分析等新方法。
第2章为免疫分析常用酶，由杨波副教授撰写。介绍酶的分类及特点，酶是生物催化剂，它们通过降低表面活化能来加快反应的进程。在反应过程中，酶自身并没有改变。几乎所有生物体在一定的条件下都可以合成多种多样的酶。生物体内的各种生化反应，几乎都是在酶的催化作用下进行的。所以，酶是生命活动的产物，又是生命活动必不可少的条件之一。本章内容包括酶的概念与发展历史；酶催化作用的专一性、高效性、所需条件的温和性等特点；酶的分类与命名；酶催化反应动力学及影响酶催化反应的因素；酶活性测定的方法及意义；最后举例说明免疫分析常用的一些酶。
第3章至第6章根据检测方法的不同分别介绍几种不同的酶联免疫分析方法。根据对酶催化反应产生的产物检测方法的不同，可以将酶联免疫分析方法分为光度酶联免疫分析、化学发光酶联免疫分析、荧光酶联免疫分析、电化学酶联免疫分析等。
第3章为光度酶联免疫分析，由牛淑妍副教授撰写。利用分光光度法对酶催化反应的产物进行检测是一种新型的免疫分析方法，从其建立到现在的三十多年里，光度酶联免疫分析技术已经日趋成熟。本章内容包括光度酶联免疫分析法（ELISA）的基本类型及其原理；ELISA法的发展及实验技术的改进；ELISA的实验条件、技术要点及质量控制；ELISA的应用及分析仪器等。
第4章为化学发光酶联免疫分析，由张书圣教授撰写。化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射确定物质含量的一种痕量分析方法。如果此种反应存在或起源于活的生物体，则相应的分析方法称为生物发光分析。生物发光亦可视为特殊形式的化学发光。本章内容包括化学发光免疫分析概述、化学发光剂、化学发光酶联免疫分析的原理、类型及应用；生物发光酶联免疫分析；化学发光定量分析仪器等。
第5章为荧光酶联免疫分析，由张书圣教授撰写。利用具有潜在荧光的底物作为酶标抗体（或抗原），当此类底物被酶分解后，其产物可产生荧光，据此可以进行荧光酶联免疫分析。这种方法综合利用了酶联免疫技术中酶解产物测定所具有的累计放大性和荧光测量的高度敏感性，大大提高了分析方法的灵敏度。本章内容包括荧光免疫分析、荧光酶联免疫分析的原理、类型、荧光底物及荧光酶联免疫分析的应用等。
第6章为电化学酶联免疫分析，由孙伟副教授撰写。电化学免疫分析法是将免疫分析同电化学检测相结合的一种免疫分析新方法，它既具有电化学分析的高灵敏度，又具有免疫分析的高选择性和专一性，因此近年来发展较为迅速，在临床检测、植物病毒血清学检测、环境监测、食品分析等各个方面得到了广泛的应用。本章内容包括电化学免疫分析；伏安酶联免疫分析法、安培酶联免疫分析法的基本原理、类型及应用；电化学酶联免疫分析和其他技术的联用等。
第7章为酶免疫传感器，由孙伟副教授撰写。传感器是能感受规定的被测定量并按一定规律将其转换成为有用信号的器件或装置，它通常由直接响应于被测定量的敏感器件、产生可用信号输出的转换器件和相应的电子线路组成。本章内容包括生物传感器的原理与分类；酶免疫传感器的基本原理；电化学酶免疫传感器、光导纤维型酶免疫传感器、压电晶体型酶免疫传感器的基本原理、类型等。
全书由焦奎教授统稿。长春应用化学研究所汪尔康院士对本书作了序，编者谨向汪尔康院士致以衷心的谢意。
本书对从事分析化学、生物学、临床医学等领域的基础研究、应用研究人员提供了理解相关基本理论和技术的途径，也可作为相关专业研究生、本科生的教学参考书。
由于作者水平所限，有些方面可能还存在欠缺，不当之处在所难免，敬请同行和读者批评指正。


编者
2003年10月

本书是《化学前沿应用丛书》分册之一。本书根据免疫分析的基本概念、原理及方法，并辅以免疫分析常用酶的分类及特点知识，对最主要的几种酶联免疫分析技术的方法及应用进行详尽的阐述，并介绍这一领域的新进展、新成果、新技术。本书既有丰富的基本理论，又有较强的实践指导意义。本书作者多年从事该领域研究，基础理论扎实，实践经验丰富。该书必将对酶联免疫分析的研究有所促进。

第1章免疫分析
11抗原
111抗原的概念
112抗原的分类
113抗原的性质
114抗原的特异性与交叉反应
115抗原的制备方法
12抗体
121免疫球蛋白（Ig）的分子结构
122Ig的血清型与多样性
123Ig的生物学活性
124各类免疫球蛋白的特性与功能
125人工制备的抗体类型
126抗体的制备方法
13抗原抗体结合反应
131抗原抗体结合反应的原理
132抗原抗体结合反应的特点
133影响抗原抗体结合反应的因素
14免疫分析
141免疫分析的类型
142免疫分析的方法
143根据免疫分析中是否引入标记物进行分类
15非标记免疫分析
151沉淀反应
152免疫扩散
153免疫电泳
154免疫浊度
155凝集反应
16标记免疫分析
17免疫分析新方法
171胶体金标记免疫分析
172脂质体放大免疫分析
173流动注射免疫分析
174免疫PCR技术
175毛细管电泳免疫分析
176多组分免疫分析
177控温相免疫分析
178免疫微球分析法
参考文献
第2章免疫分析常用酶
21酶的基本概念与发展历史
211酶的基本概念
212酶的发展历史
213酶在生命活动中的作用
22酶催化作用的特点
221酶催化作用的专一性
222酶催化作用的高效性
223酶催化作用条件的温和性
23酶的分类与命名
231蛋白类酶的分类与命名
232核酸类酶的分类
24酶催化反应动力学
25影响酶催化反应的因素
251温度
252酸度
253底物及酶的浓度
254酶的活化
255酶活性的抑制
26酶活性的测定
261酶的活性单位
262酶的转换数与催化周期
263酶活性的测定方法
264酶活性测定的意义
27免疫分析常用酶
271过氧化物酶
272酸性磷酸酶
273碱性磷酸酶
274βD半乳糖苷酶
275葡萄糖氧化酶
276脲酶
277青霉素酶
278过氧化氢酶
279葡萄糖淀粉酶
2710碳酸酐酶
2711乙酰胆碱酶
2712葡萄糖6磷酸脱氢酶
2713溶菌酶
2714苹果酸脱氢酶
2715无机焦磷酸酶
2716荧光素酶
2717丙酮酸激酶
参考文献
第3章光度酶联免疫分析
31光度酶联免疫分析法（ELISA）的基本类型及原理
311双抗体夹心法
312间接法
313竞争法
314异种动物双抗体夹心法
315抗酶抗体法
316竞争性抑制法
317双夹心法
318抗原直接包被法
32ELISA法的发展
321斑点ELISA法
322单克隆抗体捕获ELISA法
323聚合酶链式反应ELISA法
324F(ab′)2ELISA法
325A蛋白法
326C1qELISA法
33ELISA法实验技术的改进
331快速ELISA诊断试剂盒
332双显色ELISA法
333振荡态ELISA法
334离心加速ELISA法
335磁微粒ELISA法
336其他快速ELISA法
337ELISA和其他分析技术结合
34ELISA放大系统
341生物素亲和素系统
342碱性磷酸酶放大系统
343凝血因子的级联放大系统
344微粒放大
345催化沉积
35ELISA实验条件和技术要点
351固相载体的选择和试剂的制备
352反应条件的选择和方法的标准化
36质量控制
361酶免疫测定的干扰因素与对策
362ELISA中阴性本底的形成原因和消除方法
363确定ELISA试验阳性临界值
364缩小ELISA检测误差
365结果分析
37ELISA的应用
371ELISA在医学检测中的应用
372ELISA在食品检测中的应用
373ELISA在水产品检测中的应用
374ELISA在植物病毒检测中的应用
375ELISA在动物检疫检测中的应用
376ELISA在农药残留检测中的应用
377ELISA在兽药残留检测中的应用
378ELISA在捕食作用研究中的应用
38ELISA分析仪器
381分离式酶联免疫仪器
382组合式的酶联免疫仪器
383Micro plate仪器发展的某些动态
参考文献
第4章化学发光酶联免疫分析
41化学发光免疫分析概述
411标记化学发光物质的化学发光免疫分析
412标记荧光物质的荧光化学发光免疫分析
413化学发光酶联免疫分析
414电化学发光免疫分析
42化学发光剂
421吖啶酯类化合物
422氨基苯二酰肼类化合物
423咪唑类化合物
424苯酚类化合物
425芳基草酸酯类化合物
43化学发光酶联免疫分析
431标记过氧化物酶的化学发光酶联免疫分析
432标记葡萄糖氧化酶的化学发光酶联免疫分析
433增强化学发光酶联免疫分析
44化学发光酶联免疫分析的应用
441化学发光酶捕获免疫测定大肠杆菌
442偶合反应化学发光酶联免疫分析测定人血清甲胎蛋白
443增强化学发光酶联免疫分析法测定人绒毛膜促性腺激素
444增强化学发光酶联免疫分析法测定血清中的铁蛋白
45生物发光酶联免疫分析
451荧光素酶FMN细菌生物发光体系
452荧光素荧光素酶生物发光体系
46化学发光定量分析仪器概述
461程控网络主要特点及应用方法
462ACS180化学发光分析系统
463ACS180化学发光免疫分析系统工作原理
参考文献
第5章荧光酶联免疫分析
51荧光免疫分析
511荧光免疫分析的原理
512几种常见的荧光标记物
513荧光免疫分析技术
52荧光酶联免疫分析
521荧光酶联免疫分析的原理
522荧光酶联免疫分析对荧光底物的要求
523荧光酶联免疫分析的仪器
524荧光酶联免疫分析与普通酶免疫分析的比较
53荧光酶联免疫分析的应用
531荧光酶联免疫分析测定血清中的肝癌细胞
532微粒子荧光酶联免疫分析法定量检测乙型肝炎E抗原
533氯化血红素作为模拟酶荧光免疫分析测定乙型肝炎表面抗原
534应用全自动荧光酶联免疫分析系统同时检测艾滋病毒抗体和p24抗原
535荧光酶联免疫分析测定人血清乙型肝炎表面抗原及抗体
参考文献
第6章电化学酶联免疫分析
61电化学免疫分析
611异相电化学免疫分析法
612均相电化学免疫分析法
613电化学酶联免疫分析
62伏安酶联免疫分析法
621伏安法测定基本原理
622以HRP为标记酶的伏安酶联免疫分析法
623以AP为标记酶的伏安酶联免疫分析法
624其他酶标记的伏安酶联免疫分析法
625伏安酶联免疫分析法在植物病毒血清学检测中的应用
626伏安酶联免疫分析法在其他方面的应用
63安培酶联免疫分析法
631安培法测定基本原理
632安培酶联免疫分析常用的酶底物体系
633高效液相色谱安培酶联免疫分析
634流动注射安培酶联免疫分析
635毛细管电泳安培酶联免疫分析
636安培酶联免疫分析法的应用
64电化学酶联免疫分析和其他技术的联用
641毛细管电化学酶联免疫分析
642磁微粒电化学酶联免疫分析
参考文献
第7章酶免疫传感器
71生物传感器的原理与分类
711生物活性物质的分子识别功能
712生物活性物质的固定化技术
713信号转换器的基本类型
72酶免疫传感器的基本原理
721酶传感器
722免疫传感器
723酶免疫传感器
73电化学酶免疫传感器
731电化学信号转换器的基本原理
732电化学酶传感器
733电化学免疫传感器
734电化学酶免疫传感器
74光导纤维型酶免疫传感器
741光导纤维型信号转换器的基本原理
742光导纤维型酶传感器
743光导纤维型免疫传感器
744光学酶免疫传感器
75压电晶体型酶免疫传感器
751压电晶体型信号转换器的基本原理
752压电晶体型酶传感器
753压电晶体型免疫传感器
754压电晶体型酶免疫传感器
参考文献