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动物细胞培养技术

动物细胞培养技术

  • 作者
  • 史利军、李英俊、孙立旦 主编

本书详细介绍了动物细胞培养技术中培养液与培养基、培养设备设施、原代细胞培养技术、细胞建系和传代培养技术、动物细胞的冻存和复苏及污染检测、细胞融合与单克隆抗体技术等内容。本书以动物细胞培养工作流程为导向,以学生综合能力培养为本位,以实践性、应用性为特色,将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体,充分体现技能培养的特色。 本书可作为生物技术、生物制药、动物医学、...


  • ¥45.00

ISBN: 978-7-122-38016-6

版次: 1

出版时间: 2021-01-01

图书介绍

ISBN:978-7-122-38016-6

语种:汉文

开本:32

出版时间:2021-01-01

装帧:平

页数:255

编辑推荐

1.以动物细胞培养工作流程为导向,培养学生综合实验能力;2.以实践性、应用性为特色,将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体,充分体现技能培养的特色;3.读者覆盖面广,可作为生物技术、生物制药、动物医学、动物科学以及医学类本科生、专科生的实验参考教材,也可作为组织与细胞培养相关领域研究人员的指导资料。

图书前言

组织细胞培养技术是现代生物技术的重要组成部分,已成为从事生命科学相关研究工作必备的一项基本技能。组织细胞培养技术是从动物体或人体内取出细胞或者组织,通过分散处理,模拟体内生理环境,在无菌、适温和丰富的营养条件下,让其在体外的培养瓶、培养基或大规模细胞培养反应器中继续生长和增殖的一门技术。
本书的编写目的是通过以动物细胞培养工作流程为导向,以综合能力培养为本位,以实践性、应用性为特色,将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体,充分体现技能培养的特色,为今后从事细胞培养相关的工作打下扎实的实验基础。本书可作为从事生物技术、生物制药、医疗器械生物学评价、动物医学、动物科学实验人员以及医学类本科生、专科生实验时的参考教材,同时也可作为组织与细胞培养相关领域研究人员的参考用书。
参加本书编写的人员来自以下单位:中国农业科学院北京畜牧兽医研究所(史利军、崔尚金、袁维峰、秦彤、张广智),北京通和立泰生物科技有限公司(李英俊、孙立旦、吕彦锋、刘美、杨飞霞、张朋辉、张志慧、张迪、王绍雄、王鹏杰、梁丽娜、白洪旭),甘肃农业大学(包世俊),内蒙古民族大学(刘锴、崔一龙),西藏职业技术学院(金红岩、顾庆云、王俊书、徐进强),中国农业科学院农产品加工研究所(李淑英),军事医学研究院卫生勤务与血液研究所(尹惠琼)。
本书编写过程中得到了军事医学研究院方厚华教授和北京城市学院张亚兰教授的悉心指导,提出了诚恳的修改意见并审定了全书,在此表示诚挚的谢意。
本书出版得到了北京市科技计划课题“医疗器械研发与一致性评价公共服务平台(Z191100005619015)”,中关村国家自主创新示范区高精尖产业协同创新平台建设项目“医疗器械动物实验科技平台”,国家重点研发计划“宠物病毒性传染病新型生物治疗制剂研究与产品创制(2016YFD0501000)”经费的资助。
由于水平有限,书中难免有不足及不妥之处,恳请读者不吝指正。

编者
2020年8月

作者简介

史利军,中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,副研究员,预防兽医学专业博士,多年来一直从事分子病毒与分子免疫相关的研究工作。目前,主持课题5项,包括国家重点研发项目、合作开发转化项目、中央级公益性科研院所基金项目、“948”项目等。课题名称如“猫泛白细胞减少症新型生物治疗制剂的研发”“犬冠状病毒病原胶体金检测试纸条的联合研发”“猫泛白细胞减少症病原胶体金检测试纸条的联合研发”“犬细小病毒治疗性免疫球蛋白的研究”等。近年发表SCI文章10篇,发表中文核心以上科研论文55篇。以主编身份出版著作11本,副主编3本。通过课题的实施与开展,熟悉多种动物病毒的培养特性和相应细胞的培养要求,在动物细胞培养方面积累了很多的经验。

精彩书摘

本书详细介绍了动物细胞培养技术中培养液与培养基、培养设备设施、原代细胞培养技术、细胞建系和传代培养技术、动物细胞的冻存和复苏及污染检测、细胞融合与单克隆抗体技术等内容。本书以动物细胞培养工作流程为导向,以学生综合能力培养为本位,以实践性、应用性为特色,将实验准备、细胞培养、细胞研究融为一体,充分体现技能培养的特色。
本书可作为生物技术、生物制药、动物医学、动物科学以及医学类本科生、专科生实验时的参考教材,同时也可作为组织与细胞培养相关领域研究人员的指导资料。

目录

第一章绪论001
第一节动物细胞培养发展简史001
第二节细胞培养的特点与应用003
一、细胞培养的特点003
二、细胞培养技术的应用研究005
第三节细胞培养生物学008
一、体外培养细胞与体内细胞的差异与分化008
二、体外培养细胞的类型009
三、体外培养细胞的生长与增殖过程012
四、细胞周期017
第四节细胞培养条件与影响因素020
一、无菌环境020
二、细胞分离方法021
三、细胞培养温度022
四、细胞培养基的成分022
五、接种密度023
六、培养基的pH值024
七、细胞的冻存与复苏024
八、附着底物025
九、细胞供体年龄027

第二章培养用液与培养基028
第一节培养基的基本性质028
一、营养成分028
二、pH值030
三、渗透压030
四、缓冲能力030
五、促生长因子及激素031
六、无毒、无污染031
第二节水和平衡盐溶液032
一、水032
二、平衡盐溶液032
第三节天然培养基034
一、血清034
二、血浆039
三、鸡胚浸出液040
四、水解乳蛋白041
五、胶原042
第四节合成培养基043
一、基本组分043
二、常用细胞培养基046
第五节细胞培养其它常用液053
一、平衡盐溶液(Balanced salt solution,BSS)053
二、消化液053
三、pH调整液055
四、抗生素055
五、谷氨酰胺补充液056
六、二肽谷氨酰胺(L-丙氨酰-L-谷氨酰胺)056

第三章培养用设施与设备处理057
第一节细胞培养实验室057
一、无菌操作区058
二、孵育区062
三、制备区062
四、储藏区062
五、清洗和消毒灭菌区062
第二节细胞培养用仪器及设备062
一、CO2培养箱063
二、超净工作台/生物安全柜063
三、纯水系统063
四、细胞冷冻储存器064
五、冰箱065
六、恒温水浴065
七、离心机066
八、显微镜066
九、高压蒸汽灭菌器066
十、电热烘干箱067
十一、特殊设备067
第三节细胞培养用器械及器皿068
第四节培养用品的处理071
一、培养用品的清洗071
二、包装075
三、消毒灭菌076
四、消毒方法的选择081

第四章原代细胞培养技术083
第一节原代培养基本知识083
一、原代细胞的分离方法084
二、原代细胞的纯化方法086
三、原代细胞培养086
四、原代细胞的生物学鉴定086
五、注意事项087
第二节上皮组织细胞的培养089
一、试剂与器材090
二、原代细胞的分离和纯化090
三、肠上皮细胞的鉴定092
四、注意事项093
第三节结缔组织细胞的培养094
一、疏松结缔组织095
二、致密结缔组织095
三、脂肪组织095
四、网状组织096
五、鸡成纤维细胞的原代培养096
第四节肌组织细胞的培养100
一、骨骼肌100
二、平滑肌101
三、心肌101
四、骨骼肌卫星细胞的培养101
第五节神经组织细胞的培养104
一、神经细胞的原代培养105
二、神经细胞组织的培养105
三、神经细胞原代培养的意义108
第六节干细胞的培养109
一、干细胞的分类109
二、胚胎干细胞的培养110
三、成体干细胞的培养114

第五章细胞建系、传代培养技术118
第一节正常细胞系的建立和鉴定118
一、细胞系的建立118
二、细胞系的鉴定119
第二节癌细胞系的建立和鉴定121
一、细胞系的建立121
二、细胞系的鉴定122
第三节传代培养基本知识122
一、传代培养的过程124
二、Vero细胞的培养128
三、HeLa细胞的培养131
第四节传代细胞的大规模培养133
一、悬浮规模培养134
二、单层规模培养134
三、动物细胞大规模培养的方法135
四、动物大规模培养技术的应用144
五、动物细胞生物反应器145
六、大规模培养技术的操作方式149

第六章动物细胞的冻存、复苏及污染检测157
第一节动物细胞冻存157
一、冻存的必要性157
二、冷冻保存的原理158
三、影响冻存细胞活性的因素159
四、细胞冻存方法162
第二节动物细胞复苏167
一、细胞复苏的原理167
二、细胞复苏的方法168
三、细胞复苏的要点169
第三节细胞培养污染检测170
一、可见微生物污染检测170
二、支原体检测171
三、病毒污染检测171

第七章细胞融合与单克隆抗体技术173
第一节单克隆抗体的概念173
第二节杂交瘤技术的诞生174
第三节单克隆抗体的制备176
一、动物免疫177
二、细胞融合180
三、杂交瘤细胞筛选186
四、杂交瘤细胞的克隆化197
五、杂交瘤细胞的冻存与复苏199
六、单抗特性的鉴定201
第四节单克隆抗体的生产208
一、动物体内生产单抗的方法208
二、体外培养生产单抗的方法209
三、杂交瘤细胞的无血清培养211
第五节单克隆抗体的纯化212
一、腹水型单抗的纯化212
二、单抗的粗提213
第六节单克隆抗体的标记215
一、酶标记215
二、荧光素标记219
三、同位素标记220
四、生物素标记222
五、其它标记技术223

附录224
一、常用的动物细胞系224
二、细胞培养常用术语228
三、细胞培养常用缩写词237
四、常用培养基成分和配方239
五、细胞计数(台盼蓝细胞染色计数)248
六、细胞生长曲线的绘制250

参考文献253

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