图书介绍
图书前言
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精彩书摘
本书分为3个部分对药物蛋白质的分离纯化技术进行介绍。第1部分介绍了以色谱技术为主的蛋白质分离纯化的主流技术和主要方法；第2部分阐述了上述技术在主要药物蛋白质分离纯化中的应用，所涉及蛋白质包括膜蛋白、重组蛋白质的包涵体、植物蛋白质、动物组织来源的蛋白质、乳来源的蛋白质等；第3部分说明了在药物蛋白质研究开发中占重要地位的蛋白质保存方法和检测技术。附录中收录了与蛋白质分离纯化有关的检定方法以及有关数据的换算方法。 此外，本书的特色还在于在阐述技术、原理的同时结合实例，图文并茂，形象生动，增强了图书内容的可操作性。 本书适用于从事生物、制药、化学、医学、环境等领域的基础研究和应用研究的广大教科研人员，同时对相关专业研究生和高年级本科生及教师而言也是一本内容翔实、用途广泛的教材或教学参考书，此书对于有志于涉足蛋白质分离纯化研究及应用领域的同仁来说，也是一本不可多得的入门指导手册。
目录
绪论（李校堃 袁 辉）1 01 蛋白质提取1 011 原材料的选择1 012 提取方法2 02 色谱6 021 吸附剂的选择6 022 预实验6 023 色谱顺序6 03 分析和检测7 031 电泳7 032 分级分离的监控7 033 活性测定8 034 蛋白质含量的确定9 04 纯化策略9 041 三步纯化策略11 042 色谱技术的顺序12 043 纯化的要求14 05 冷冻干燥保存15 06 规模放大的指导方针15 第1部分 分离纯化方法 第1章 离心（袁 辉 武育荣）17 11 原理和分类17 111 基本原理17 112 分类20 113 分析性超速离心24 12 应用实例25 121 应用超速离心法分离血浆脂蛋白25 122 Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞26 13 标准操作和注意事项27 131 关于密度离心法梯度溶液的制备27 132 超离心后样品的收集28 133 关于连续流离心机操作的问题解答28 134 离心机的常见故障及其排除30 第2章 细胞破碎（谢秋玲 洪 岸）32 21 细胞的结构32 211 细菌的结构32 212 酵母的结构32 213 动物细胞的结构32 214 植物细胞的结构32 22 破碎缓冲液33 23 破碎的方法33 231 机械法33 232 非机械法36 24 影响破碎率的因素和检测破碎率的方法37 241 影响因素37 242 检测方法38 25 破碎仪器38 251 珠磨机38 252 高压均质机39 26 破碎实例40 261 破碎材料40 262 破碎仪40 263 破碎方法40 264 仪器的清洗41 265 注意事项41 参考文献41 第3章 蛋白质沉淀（张 玲 袁 辉 洪 岸）42 31 盐析法沉淀42 311 盐析法沉淀的原理42 312 盐析的影响因素44 313 操作步骤44 32 有机溶剂沉淀45 33 聚合物沉淀46 34 等电点沉淀47 35 选择性变性沉淀47 351 温度变性47 352 pH变性48 353 有机溶剂变性48 第4章 溶液的制备和膜过滤 （谢秋玲 袁 辉 李校堃) 49 41 缓冲液49 411 简介49 412 缓冲液的制备52 413 缓冲液的更换56 42 膜过滤58 421 微过滤58 422 标准流动净化59 423 超滤59 424 病毒过滤60 425 高效切线流动过滤60 426 膜色谱61 43 应用实例61 431 血浆制品61 432 血清62 433 哺乳动物培养63 434 注释 66 44 术语67 参考文献67 第5章 色谱技术导论（袁 辉 李校堃) 68 51 基本概念和种类68 52 固定相70 521 基质特性70 522 固定相技术72 523 配基介绍73 524 配体-蛋白质相互作用73 53 色谱理论75 531 色谱的量单位75 532 在吸附色谱中的保留78 54 色谱过程81 541 装柱81 542 加样82 543 色谱的洗脱82 55 仪器设备83 551 色谱系统83 552 色谱系统的部件85 参考文献88 第6章 凝胶排阻色谱（袁 辉 钱垂文）90 61 简介90 62 基质选择91 621 可用基质特性91 622 化学和吸附特性93 623 选择曲线和分离范围94 624 基质孔体积94 63 理论考虑95 631 通过凝胶过滤估算分子大小95 632 柱效和峰区带扩展96 633 影响分辨率的参数98 64 装柱100 641 柱材料及附件100 642 装柱过程100 643 装柱质量的评价101 644 装柱落差压102 65 样品与缓冲液103 651 缓冲液与添加剂103 652 样品104 653 校正物质104 66 凝胶排阻色谱系统105 661 上样105 662 洗脱105 663 最佳流速106 664 样品检测107 665 系统（弥散）扩散108 67 应用实例108 671 脱盐--大量血红蛋白样品脱盐108 672 蛋白质混合物组分收集--抗IgE-β-半乳糖苷酶结合物的纯化108 673 凝胶过滤分析--葡萄球菌肠毒素B的纯化监测，小鸡干扰素分子 质量的确定109 674 孔径大小的确定--Superose○R 6表观孔直径的估算111 675 混合模式分离--酵母菌细胞色素氧化酶的初始纯化112 68 凝胶过滤部分所使用的公式和符号113 69 分子质量标准品114 参考文献115 第7章 离子交换色谱（袁 辉 钱垂文）119 71 离子交换色谱的原理120 72 离子交换色谱的基本概念121 721 离子交换色谱的分辨率121 722 容量因子122 723 柱效122 724 选择性123 725 容量123 73 离子交换剂的种类124 74 样品准备125 741 样品浓度125 742 样品组成125 743 样品体积126 744 样品黏度126 745 样品制备126 75 柱装填126 751 柱构造126 752 柱装填录像126 753 检查填充126 76 交换容量的测定127 761 阴离子交换树脂交换容量的测定127 762 阳离子交换树脂交换容量的测定127 77 离子交换介质的清洗和储存128 771 再生128 772 清洗、清洁和灭菌工艺128 773 凝胶和柱的储存128 78 离子交换色谱的应用策略129 781 结合条件129 782 容量129 783 起始条件129 784 pH130 785 离子强度130 786 上样130 787 洗脱130 788 梯度形状的选择131 789 流速131 7810 缓冲液的配制132 7811 规模放大132 79 应用实例133 791 酶133 792 免疫球蛋白133 793 核酸分离133 794 多肽和多核苷酸133 710 常见问题及其解决135 第8章 亲和色谱（袁 辉）138 81 亲和色谱的动力学139 811 结合平衡：非选择性洗脱 139 812 结合平衡：选择性洗脱或者竞争性洗脱140 813 竞争性洗脱的结果141 814 吸附和解吸附的动力学141 82 亲和色谱载体142 83 载体的处理143 831 载体的活化143 832 配体偶联143 833 间隔臂144 834 封闭144 84 洗脱策略144 841 洗脱方法的选择144 842 流速145 843 举例146 85 亲和色谱操作147 851 预处理147 852 柱的填充和制备148 853 上样注意事项148 854 洗涤149 855 洗脱149 86 亲和色谱存在的问题149 861 产物变性149 862 渗漏150 863 成本152 87 基质的选择152 871 配体的特性154 872 亲和吸附剂制备的评价154 第9章 羟基磷灰石色谱（袁 辉 朱利民 ) 157 91 原理158 911 蛋白质结合的机理158 912 洗脱行为158 913 保留时间和缓冲液pH159 914 BSA和 IgG 结合容量159 92 方法的开发159 921 双梯度筛选159 922 增强抗体的溶解性159 923 优点159 93 特性160 931 羟基磷灰石的特性160 932 化学稳定性160 94 比较161 95 压降计算器162 96 柱填充：中试和工艺柱163 97 应用案例164 971 抗肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞抗原的纯化165 972 马IgGT抗蛇毒血清的纯化166 973 从转基因乳中纯化重组人α1抗胰蛋白酶169 974 IgG的纯化171 975 转基因IgG纯化173 第10章 色谱聚焦（张 玲）175 101 原理175 1011 pH梯度的形成175 1012 聚焦介质的聚焦175 1013 蛋白质的等电点与聚焦效应的关系175 1014 解吸附效应176 102 色谱聚焦介质176 103 色谱聚焦缓冲液177 1031 起始缓冲液177 1032 样品缓冲液177 1033 洗脱缓冲液177 104 色谱聚焦应用实例--昆虫谷胱甘肽S-转移酶的分离纯化177 第11章 逆流色谱（张天佑）179 111 基础知识179 1111 发展史179 1112 逆流分溶法简介179 112 仪器--螺旋管行星式离心分离仪180 1121 引言180 1122 实现逆流过程的机制181 1123 分离实例182 1124 各个物理参数对分离效果的影响183 113 大分子蛋白质逆流色谱法186 1131 引言186 1132 聚合物水相系统的基本特征186 1133 大分子在聚合物水相系统中的分配188 1134 聚合物水相系统用于逆流分配192 1135 正交轴逆流色谱仪192 1136 正交轴逆流色谱法分离生物大分子196 114 结语200 附录 中国开展逆流色谱技术及应用研究的进程201 参考文献204 第2部分 分离纯化技术的应用 第12章 膜蛋白的纯化策略（李校堃 袁 辉 华子春）205 121 介绍205 122 保持催化活性的常用策略206 123 分离技术的选择206 124 选择蛋白质来源和细胞裂解的方式207 125 蛋白质活性实验208 1251 催化活性和其他特性测试208 1252 总蛋白质定量测试209 126 膜蛋白的溶解和稳定209 1261 缓冲液的选择209 1262 去垢剂的选择210 1263 蛋白质稳定性和蛋白酶的抑制213 参考文献214 第13章 膜蛋白纯化中的色谱技术和基本操作（李校堃 袁 辉 杨树林）216 131 介绍216 132 溶解-沉淀216 1321 差分萃取216 1322 相分离和级分沉淀218 1323 离心219 133 样品的富集、缓冲液体系的改变以及去垢剂的去除和交换220 1331 样品富集220 1332 缓冲液体系的改变220 1333 去垢剂的去除和交换221 134 色谱技术221 1341 羟基磷灰石色谱222 1342 离子交换色谱224 1343 色谱聚焦226 1344 金属螯合色谱229 1345 亲和色谱230 1346 共价色谱232 1347 疏水作用色谱233 1348 凝胶过滤233 参考文献235 第14章 重组蛋白质的包涵体纯化（张 玲）237 141 细胞破碎237 142 包涵体表达与可溶性表达238 1421 增加可溶性表达的策略238 1422 药物蛋白以包涵体表达238 143 包涵体复性240 1431 复性机理240 1432 复性过程中促复性添加剂240 1433 体外复性中应注意
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ISBN：7-5025-6463-2
语种：中文
开本：16
出版时间：2005-03-15
装帧：平装
页数：392